产品货号：
KL230328
中文名称：
大肠杆菌化学感受态细胞制备试剂盒
英文名称：
E.coli Competent Cell Preparation Kit
产品规格：
20T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒是基于Inoue方法的、高效快速E.coli化学感受态细胞制备试剂盒。
- 一步式操作，离心后重悬细胞即可，非常简单。
- 转化率高，转化效率一般都在109/μg质粒以上。
- 重复性好，可用于各种E.coli菌种，包括K12系（如JM109、DH5a等）和B系（如BL21系列菌种）。
- 适用于低、中、高拷贝的各种质粒。
| 组分 | 规格 |
| E.coli化学感受态细胞制备溶液A | 200mL |
| E.coli化学感受态细胞制备溶液B | 3mL |
保存：-20℃，其中溶液B置于4℃，有效期1年。
本试剂盒足够20次制备，每次制备可以用25mL菌液制备100μL×20管感受态细胞。所得感受态细胞在-80℃至少可以保存半年以上。
无菌超纯水、SOB液体培养基、温控摇床。
- 划盘，37℃过夜培养出单菌落
- 挑取10个平皿上的单菌落(2～3mm直径)，用接种环接种至25mL SOB培养基中，在18℃ 250-300转/分钟条件下摇晃培养2～3小时，直至A600值为0.6，同时进行剧烈摇动(转速200～250rpm)。
- 将培养瓶从培养箱中取出并置于冰中静置10min。再将培养液转移至25mL的离心瓶中，在4℃下以2500×g(在Beckmann J-6B离心机中转速为3000×g)离心10分钟。
- 倒去培养液，加8mL预冷的E.coli化学感受态细胞制备溶液A重悬细菌沉淀。轻轻旋转，不要用振荡器或吹吸混匀。冰浴静置10min。
- 在4℃下以2500×g离心10min收集菌体。
- 用2mL预冷的E.coli化学感受态细胞制备溶液A轻轻重悬沉淀。加0.15mL E.coli化学感受态细胞制备溶液B。轻轻混匀细菌悬液，冰浴静置10min。
- 迅速将悬液分装到冷却的无菌微量离心管中，封紧管口，没入液氮中快速冰冻感受态细胞。贮存于-80℃备用。25mL菌液一次可以制备0.1mL×20管感受态细胞。
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